CUT&Tag (Cleavage Under Targets and Tagmentation),即靶向剪切及转座酶技术,是一种利用酶锚定技
术进行高效、高分辨率的 DNA 测序文库构建方法,同时是一种新的 DNA-蛋白质互作研究方法,可用于检测组蛋
白、RNA polymerase II 和转录因子等具有 DNA 结合功能的蛋白种类,揭示更多染色质在调控基因表达方面的重
要作用,有助于分析细胞量少的样本的特定染色质特征,进一步了解基因调控。可以说,CUT&Tag 技术自问世以
来一直受表观遗传学研究者的青睐。
CUT&Tag 使用的 ChiTag 是 ProteinA 蛋白与 Tn5 转座酶的融合蛋白,ProteinA 蛋白可在细胞内直接结
合抗体(抗体结合在目的蛋白上),连带的 Tn5 转座酶将切割目的蛋白附近的 DNA 序列,并将 DNA 片段连上
测序用接头,并释放到细胞外。CUT&Tag 整个实验的信噪比大幅提高,同时简化了实验步骤,PCR 之后可直接
用于高通量测序。与 ChIP-Seq 相比,CUT&Tag 技术具有以下优点:无需甲醛交联和免疫共沉淀步骤,省时高
效,所需的细胞量少,背景信号低,可重复性好等,甚至可用于单细胞水平测序。