LbCas12a(又名Cpf)核酸酶来源于Lachnospiraceae bacterium ND2006 菌株。LbCas12a属于2类V型CRISPR效应蛋白,是一种依赖crRNA介导的核酸内切酶,在靶标双链DNA存在PAM(TTN)序列的情况下,由crRNA介导特异性识别并切割双链DNA,而LbCas12a 特异性切割靶标单链DNA不依赖PAM序列。同时,LbCas12a-crRNA复合物与互补单链DNA或者双链DNA结合后,其非特异性ssDNA反式切割活性被激活,通过设计两端标记荧光基团或其它小分子标记的单链Reporter DNA,可实现Cas12a对DNA模板的检测和信号放大。可通过荧光仪和试纸条观察结果。
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