iPSC基因编辑
诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC),理论上可以定向分化成所有细胞类型和组织器官。iPS细胞与编辑编辑技术相结合,具有广泛的应用前景,可应用于疾病模型构建、药物筛选、个性化的细胞治疗和再生医学等领域。
服务详情
服务类型 : 基因敲除iPS细胞/基因点突变iPS细胞/基因过表达iPS细胞/基因干扰iPS细胞/iPS细胞相关的CRISPR文库筛选
详情描述
艾迪基因拥有多年的干细胞培养经验和成熟的基因编辑平台,可针对iPS细胞实现高效的基因编辑。我们注重iPS细胞的培养体系,确保iPS细胞不会在编辑过程中出现分化。我们可以根据客户需求,构建如基因敲除、基因点突变、基因敲入、基因过表达、基因干扰等一系列基因编辑iPS细胞模型。
iPSC体外疾病模型研究思路
基因编辑iPS细胞模型的优点
1. 可经诱导分化,获得大量的目标类型细胞,替代原代细胞用于特定个体的细胞治疗和药物筛选等。
2. 可构建人源的细胞模型或类器官,真实模拟疾病的发生,免于进行小鼠等动物实验,使研究结论更有代表性。
ipsc模型基因编辑的难点
1. ipsc培养条件苛刻,对培养基成分和培养条件有特殊的要求。
2. ipsc在编辑过程中,往往容易丢失干性,分化成其他细胞类型。
3. 不同个体、不同组织来源的ipsc编辑难度不同。
服务类型
可根据客户需求,综合基因等情况进行iPS细胞基因编辑方案设计与细胞株构建。
1. 基因敲除iPS细胞株定制
2. 基因点突变iPS细胞株定制
3. 基因敲入iPS细胞株定制
4. 基因过表达iPS细胞株定制
5. iPS细胞相关的CRISPR文库筛选
服务优势
参考文献
1.Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc四种关键因子可促进细胞重编程为iPSC
这篇文章探讨了通过特定转录因子将成熟的成纤维细胞转化为多能干细胞的技术。研究中使用了四种关键转录因子:Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc。这些因子被导入小鼠胚胎成纤维细胞和成人成纤维细胞中,通过这些因子的作用,细胞逐渐获得了多能性特征,表现出与胚胎干细胞相似的形态和基因表达模式。研究发现,重编程后的iPSCs不仅在体外能够长期培养,还具有向各种细胞类型分化的能力,包括神经细胞、心肌细胞等,这表明这些iPSCs具有良好的生物学特性和潜在的应用价值。这项研究不仅验证了四种转录因子的有效性,还为未来干细胞研究提供了新的工具,尤其在再生医学和疾病治疗领域中具有重要的应用前景。
2.iPSC衍生的肺和肺癌类器官模型用于测试药物递送的效果
肺癌仍是全球癌症相关死亡的主要原因,尽管靶向治疗取得了进展,但耐药性和系统毒性依然是主要问题。研究人员探讨了使用患者特异性肺癌和正常肺组织类器官模型,以及自体诱导多能干细胞(iPSC)-MSC衍生的细胞外囊泡(EVs)在个性化医疗中的可行性。他们将健康成纤维细胞重编程为iPSC,分化为分支肺类器官(BLO)和患者匹配的肺癌类器官(LCO),并通过简化过程从iPSC-MSC中分离EVs,使用0.07 µg/mL cisplatin,应用于这两种类器官模型,并通过LDH和CCK8测试记录细胞毒性。结果显示,成纤维细胞来源的iPSC表现出正常核型和多能性,iPSC衍生的BLO和LCO显示肺标志物的表达。iPSC-MSC来源的负载cisplatin的EVs未在两种类器官模型中引起细胞毒性,而20 µg/mL的cisplatin则对LCO表现出细胞毒性。本研究展示了使用自体或同种异体iPSC-MSC EVs作为肺癌药物递送测试的初步验证方法。
3.多能干细胞(iPSCs)衍生的巨噬细胞可作为研究病毒生物学的有效模型
这项研究评估了人源诱导多能干细胞(iPSCs)衍生的巨噬细胞是否可以作为研究病毒生物学的有效模型。研究发现,这些iPSC衍生的巨噬细胞能够支持HIV-1、登革病毒和流感病毒的复制,且其复制动力学和表型与传统的血液单核细胞衍生的巨噬细胞相似。通过流式细胞术、RNA测序和染色质可及性分析,iPSC衍生的巨噬细胞在表面标志物和基因表达特征上与人血液单核细胞衍生的巨噬细胞几乎没有区别。此外,从黑猩猩成纤维细胞中生成的iPSC系显示出对登革病毒的不同易感性,为研究病毒的种属嗜性提供了有价值的资源。研究还发现,无论是血液衍生还是iPSC衍生的巨噬细胞,都能在流感病毒生命周期的晚期限制病毒的复制。整体而言,iPSC衍生的巨噬细胞被证明是血液单核细胞衍生巨噬细胞的一个有效替代方案,用于病毒生物学的研究。