基因敲入细胞
基因定点敲入(KI,gene knock in)是指外源DNA片段插入到指定的基因组位置,使该片段行使相应的功能。可以赋予细胞或生物体新的功能或恢复缺陷基因的正常功能,可用于研究基因功能与调控机制、构建疾病模型或开展基因治疗。
服务详情
服务类型 : 荧光蛋白定点敲入/标签蛋白定点敲入/特定位点敲入
交付标准 : 基因敲入单克隆细胞1株(2管细胞,1×10^6/管)
艾迪基因创新研发的高效基因敲入技术,采用了升级的CRISPR/Cas9系统。积攒十几年的基因编辑经验,总结出来最优的gRNA和Donor载体设计策略,具有更高的阳性率和更广的敲入位点选择性。
服务优势
服务类型
可根据客户需求,综合基因和细胞等情况进行敲入方案设计。
荧光蛋白定点敲入: EFGP、Luc、mCherry等
标签蛋白定点敲入: Flag、HA、Myc、HiBiT等
特定DNA片段敲入目标基因组位置: /
特定DNA片段敲入基因组安全位点: /
服务流程
1.质粒法
参考文献
1.基于CLASH技术的基因敲入策略
CLASH(Cas9-Linked Adaptor Synthesis for Homology-directed repair)技术能够在大规模细胞工程中实现高效的基因敲入。该方法结合了Cas9蛋白和适配子合成,使得在多种细胞类型中进行平行敲入成为可能。通过在DNA修复过程中提供特定的适配子来提高同源重组修复(HDR)的效率,从而大大提升基因敲入的成功率。该技术展示了在细胞工程和基因编辑中的巨大潜力,特别是在需要多基因修改的复杂生物工程应用中。
2.通过同步细胞周期来增强CRISPR介导的同源重组修复(HDR)效率
该研究探讨了通过同步细胞周期来增强CRISPR介导的同源重组修复(HDR)效率的方法。使用小分子调节细胞周期,在各种细胞系中实现了1.2-1.5倍的KI效率提高。研究还展示了该方法在动物胚胎中的应用,显著提高了猪胚胎中的KI频率。这一方法通过调节细胞进入有利于HDR的周期阶段,从而提高了基因敲入的成功率,为CRISPR基因编辑提供了新的优化策略。