产品属性

中文名：土壤过氧化氢酶 (S-CAT) 活性检测试剂盒（紫外微量法）

英文名：Soil Catalase (S-CAT) Activity Assay Kit (UV Micro Method)

纯度：BioReagent

货号：S1505477-96T

包装：96T

存储温度：2-8°C储存

产品介绍：

  土壤过氧化氢酶（S-CAT）主要来源于土壤微生物以及植物根系的分泌物，是土壤生物代谢的重要酶类，主要功能是解除土壤中过氧化氢的毒害作用，在活性氧清除系统中具有重要作用。 

  检测原理：H₂O₂在240nm处具有特征吸收峰，土壤过氧化氢酶能够分解H₂O₂，使反应溶液在240nm处吸光值随反应时间而下降，根据吸光值变化速率即可表征土壤过氧化氢酶的活性。

  注意：正式检测前，建议选择2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

自备仪器和试剂

1、酶标仪或紫外分光光度计（能测240nm处的吸光度） 

2、96孔UV板或微量石英比色皿、可调节式移液枪及枪头

3、恒温水浴锅、恒温摇床、台式离心机、30-50目筛

4、去离子水

实验流程

1、试剂准备

2、样本制备

注意：推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻 时，需在4h内完成样品解冻。

土壤样本：新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30-50目筛。

3、实验步骤

3.1 酶标仪或紫外分光光度计预热30min，调节波长到240nm。紫外分光光度计用去离子水调零。 

3.2 操作表（下述操作在1.5mL EP管中进行）：

25℃振荡培养20min；

混匀，8,000g，25℃离心5min，取180μL上清至96孔UV板或微量石英比色皿中；

3.3 充分混匀，于240nm处测定各管吸光度，分别记为A_测定、A_无基质、A_无土。 

注意：无土管只需测定1次，每个测定管需设置一个无基质管。实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果（A_无土-A_测定）小于0.01可适当加大样本量。如果（A_无土-A_测定）大于1.5，减少提取用样本量。

 4、结果计算 注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。 4.1 用96孔UV板测定的计算公式如下： 

单位的定义：每天每g风干土样催化1μmol H₂O₂降解定义为一个酶活力单位。 

S-CAT (U/g 土样)=[(A_无土-A_测定+A_无基质)×V_反总÷(ε×d)×10⁶]÷W÷T=33×(A_无土-A_测定+A_无基质) 

参数说明： 

V_反总：反应体系总体积，3×10⁻⁴ L； 

ε：过氧化氢摩尔消光系数，4.36×10⁴ L/mol/cm； 

d：96孔UV板光径，0.5cm； 

T：反应时间，20min=1/72 d； 

W：样本质量，0.03g。 

4.2 用微量石英比色皿测定的计算公式如下： 

单位的定义：每天每g风干土样催化1μmol H₂O₂降解定义为一个酶活力单位。 S-CAT (U/g 土样)=[(A_无土-A_测定+A_无基质)×V_反总÷(ε×d)×10⁶]÷W÷T=16.5×(A_无土-A_测定+A_无基质) 

参数说明： 

V_反总：反应体系总体积，3×10⁻⁴ L； 

ε：过氧化氢摩尔消光系数，4.36×10⁴ L/mol/cm； 

d：比色皿光径，1cm； 

T：反应时间，20min=1/72 d； 

W：样本质量，0.03g。

5、结果展示

图1：本试剂盒测定土壤中过氧化氢酶的活性

注意事项

1、正式检测前，建议选择2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

2、本产品仅供科学研究使用，不适用于临床诊断。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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