mIHC(多重荧光免疫组化)技术,也称作酪胺信号放大 (Tyramide signal amplification,TSA)技术,基于信号分子沉淀(CARD)原理,在H2O2存在时,利用二抗上偶联的辣根过氧化物酶(HRP)将荧光基团上标记的底物酪胺(T)转化为具有短暂活性的中间状态(T*)分子。随后被活化的底物分子(T*)迅速与相接的蛋白分子的富含电子区域(酪氨酸残基)进行稳定的共价结合。由于相接的蛋白(HRP,抗体,目标抗原)都含有大量的酪氨酸结合位点,因此目标抗原处会富集大量酪胺和荧光素的偶联结构,使得荧光信号得到几何级放大。
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