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1. 制胶时加入YeaGreen核酸染料(每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL YeaGreen 10,000×水溶液,以此类推)。
2. 按照常规方法进行电泳。
【注】:1. 此方法比较节省染料,500 μL染料大约可以做100块50 mL的胶。
2. 由于YeaGreen 具有良好的热稳定性,可以直接添加到热的琼脂糖溶液中而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。
3. YeaGreen兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
4. 如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
5. 胶染法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
1.按照常规方法进行电泳。
2.用H2O将YeaGreen 10,000×水溶液稀释约3,300倍到0.1 M NaCl中,制成3× 染色液。(如将15 μL YeaGreen 10,000×水溶液和5 mL 1 M NaCl加到45 mL H2O中)。
3.将凝胶小心地放入合适的容器中,缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶。室温振荡染色30 min左右,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5~10%聚丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30 min到1 h,并随聚丙烯酰胺含量增加而延长。
【注】:1. 用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。
2. 3×YeaGreen染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
YeaGreen虽然具SYBR Green I 相似的光谱特性,且在凝胶染色方面效果优于SYBR Green I,但不建议用于qPCR。建议使用专为此用途设计的SUPER Green I(Cat#10206)和RTGreen(Cat#10207)。
好评度 | 商品满意度 | 服务满意度 | 发货满意度 |
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