过表达稳转株
基因过表达稳转株是指将目的基因整合进宿主细胞的基因组中，使该基因能在细胞内长期且稳定地过量表达，其在基因功能研究、疾病模型的构建、药物筛选、蛋白质生产以及基因治疗等多个领域有着广泛的应用。
艾迪基因过表达细胞库
服务详情
服务类型 : 慢病毒稳转细胞系/转座子稳转细胞系
交付标准 1）基因过表达多克隆细胞pool（2管细胞/株，1×10^6/管）
2）基因过表达单克隆细胞≥1株（2管细胞/株，1×10^6/管）
3）实验报告
艾迪基因致力于为客户提供高质量的稳转细胞系构建服务，结合多年细胞生物学经验，建立了一套成熟稳定的基因过表达实验体系，可针对多种不同细胞（包括难转染细胞、悬浮细胞），提供优质的基因过表达细胞构建服务。
服务优势
服务类型
可根据客户需求，并综合基因和细胞等情况，设计基因过表达方案。
慢病毒稳转细胞系 : 可实现大小≤5kb目的基因在细胞内的稳定表达
转座子稳转细胞系 : 可实现大小≤10kb目的基因在细胞内的稳定表达
1.慢病毒稳转株构建
2.转座子稳转株构建
成功案例
① 在A549细胞中过表达CopGFP
1）载体图谱
2）过表达效果
明场图片
GFP荧光图片
② 在HCT116细胞中过表达CopGFP
1）载体图谱
2）过表达效果
明场图片
GFP荧光图片
参考文献
1.直肠癌中过表达或敲低VASN基因
这项研究探讨了VASN在直肠癌中的作用，发现其高表达与肺转移和化疗耐药性相关。通过建立过表达和敲低VASN的稳转株，作者进一步验证了VASN在促进癌细胞迁移、侵袭和增殖方面的作用。体内和体外实验结果显示，VASN的过表达显著增强了癌细胞的侵袭能力，并降低了对化疗药物的敏感性。实验方法包括使用慢病毒载体转染VASN基因，并通过G418抗性筛选建立稳定细胞株，使用Western blot和qPCR验证VASN过表达。
2.在小鼠中过表达LBX1基因
LBX1基因位于与青少年特发性脊柱侧弯易感性高度相关的单核苷酸多态性附近，被认为是这一疾病发病机制中最强的候选基因之一。研究发现，LBX1缺失不仅导致脊柱畸形，还影响瘦体重，提示LBX1在能量代谢中可能发挥作用。本研究旨在通过分析缺失LBX1的骨骼肌小鼠的表型来验证这一假设，重点关注能量代谢。结果显示，LBX1缺失的小鼠对高脂饮食诱导的肥胖表现出更强的抵抗力，尽管突变小鼠与对照小鼠的食物摄入量相当。突变小鼠的葡萄糖耐受性更好、最大有氧能力更高、核心体温更高。此外，LBX1的过表达降低了培养细胞中的葡萄糖摄取。综合数据表明，LBX1作为能量代谢的负调节因子，其缺失增加了系统性能量消耗，从而导致瘦体重。因此，本研究提示了LBX1功能障碍与青少年特发性脊柱侧弯患者瘦体重之间的潜在关联。
3.在 SW480 和 HCT116 细胞中过表达或沉默SRSF10 基因
本研究旨在探讨富含丝氨酸和精氨酸的剪接因子10（SRSF10）在结直肠癌（CRC）中的作用及其发病机制。通过生物信息学分析预测CRC患者中SRSF10基因的表达情况，采用CCK8、Transwell、划痕实验和流式细胞术进行SRSF10基因敲低和过表达的功能实验，并通过琼脂糖凝胶电泳鉴定不同的SRSF10作用于RFC5前mRNA的转录本。结果显示，敲低SRSF10抑制了CRC细胞的增殖和迁移能力，促进了细胞凋亡并改变了CRC细胞的DNA复制；而SRSF10的高表达则增强了CRC细胞的增殖和迁移能力，并引起细胞周期的变化。特别是，高表达SRSF10降低了培养细胞中的葡萄糖摄取，进一步表明其在能量代谢中的负调节作用。本研究还揭示了在SRSF10敲低后，结直肠癌细胞中的RFC5基因发生了变化，SRSF10增加了RFC5外显子2-AS1(S)转录变体，从而通过AS1排除促进了RFC5外显子2的异常剪接，推动了结直肠癌的发展。研究表明，SRSF10通过生成RFC5外显子2中的异常剪接异构体促进了结直肠癌的进展，提示SRSF10可能成为CRC临床诊断和治疗的重要靶点。
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