测序流程
1.DNA片段的一端与引物碱基互补,固定在芯片上;
2.另一端随机与附近的另外一个引物互补,也被固定住,形成“桥(bridge)”;
3. PCR扩增,产生DNA簇;
4.DNA扩增子线性化成为单链;
5.加入改造过的DNA聚合酶和带有4种荧光标记的dNTP,每次循环只合成一个碱基;
6.用激光扫描反应板表面,读取每条模板序列第一轮反应所聚合上去的核苷酸种类;
7. 将“荧光基团”和“终止基团”化学切割,恢复3‘端粘性,继续聚合第二个核苷酸;
8.统计每轮收集到的荧光信号结果,获知模板DNA片段的序列。
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