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DeepBio得分:5567.2
DeepBio得分
是基于文献引用次数,影响因子,文献新近度等因素计算的客观产品评级,得分越高表明该产品经过越可靠的实验验证,质量可信度越高
产品属性
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退换货说明 : 不可退换 |
CRISPR-Cas9技术利用短RNA(gRNA)来引导核酸酶(Cas9)到达DNA靶点。该技术使用简单而且扩展性强,已被广泛应用于实验室研究、生物医学研究、动植物基因工程等领域。包括建立各种遗传修饰的模式生物模型、建立基因调控(如敲除、插入、抑制、激活)细胞系、动植物育种、遗传疾病修复、癌症等重大疾病治疗以及相关药物靶点筛选等。
泓迅生物提供sgRNA质粒构建服务,针对不同物种(动物、植物等)提供多种质粒构建方案,匹配实验所用材料,提高质粒构建的成功率,为您提供快速、优质的sgRNA载体构建服务。
研究基因在代谢通路或某些特定疾病发生过程中的功能,对于疾病机理研究及药物研发具有非常重要的意义。新一代基因编辑技术CRISPR以其操作简单和通用的独特优势,成为开展正向遗传学筛选实验强有力的工具。利用CRISPR技术建立可能与某类功能相关的突变体库,通过功能性筛选和富集、PCR扩增及深度测序分析,确认与这类功能相关的基因。
泓迅生物利用独创的“GPS”(Genotype,Phenotype,Synotype)平台,提供基于CRISPR sgRNA文库的一站式基因功能筛选服务。我们专利的Syno®合成技术平台,可以快速高效地实现sgRNA文库构建,并包装成慢病毒混合文库后转染细胞。结合高通量/高内涵筛选平台,利用控制细胞存活、结合免疫染色、流式细胞术等手段筛选得到所需细胞,最终通过测序等方法推断出发挥作用的靶基因。
服务优势
| 步骤 | 服务内容 | |
|---|---|---|
| 明确物种和载体 | 不同物种不同载体 | |
| 设计靶点 | 一般在不同转录产物的共同外显子上设计3-5个靶点,尽可能破坏重要的domain和所有转录产物isoform。 | |
| 合成 | 合成前确认检测靶点是否存在SNP(如果存在SNP,则不能用T7E1酶检测是否存在突变) | |
| 靶点切割活性检测 | 293T细胞内检测SSA活性 | 酶体外切割活性验证(推荐) |
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内源活性验证 (有条件选择) |
若目的细胞转染率高,如293T细胞,可转染72h后提基因组,扩增靶序列,T7E1酶切验证,进一步测序验证。 | |
| 服务项目 | 服务详情 | 周期 |
|---|---|---|
| sgRNA设计 | 针对目标基因群进行sgRNA序列设计 每个基因设计3-6条sgRNA(无物种限制) | 1-2周 |
| 芯片合成 | 将所设计的所有sgRNA及阴性对照合成在一张芯片上 | 3-4周 |
| sgRNA文库构建 | 将sgRNA构建到客户的目标载体上 | 2-3周 |
| 文库质粒大抽 | 根据发货量进行转染级质粒抽提 | 1周 |
| 文库质检及NGS验证 | 库容量大于100x、覆盖率>99% 文库正确率>80%、文库的均一性<5-10 | 2-3周 |
| 病毒包装 | 病毒滴度>108TU/mL | 2-3周 |
| 文库细胞pool构建 | 覆盖度高达99%、支持任何癌细胞系为目的细胞的构建 | 6-9周 |
| 高通量筛选 | 正向筛选实验、反向筛选实验、 药物抗性实验、报告基因检测 | 2-3周 |
| 基因功能分析与验证 | 文库QC、样本相关性、目标基因分析等 | 1-2工作日 |
| 好评度 | 商品满意度 | 服务满意度 | 发货满意度 |
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