种新的质谱数据采集方式[1]。可以依据质荷比(m/z)将质谱整个扫描范围分为若干个
窗口,然后对每个窗口中的所有母离子进行碎裂、检测,采集所有母离子的碎片离子
信息进行蛋白定性和定量。目前流行的蛋白质组学研究手段,如 iTRAQ/TMT、Label-
free、SILAC 采用的都是数据依赖性的扫描模式(Data-dependent acquisition, DDA),一
级质谱进行全扫描采集母离子信号生成一级谱图,二级质谱依次选择一级谱图中信号
强度排序为 top10/20/40 的峰进行碎裂并采集对应的子离子信息。
相对于 DDA,DIA 优势体现在:
(1)采集一级质谱 full scan 的全部母离子及对应的二级质谱子离子信息,具有更高
的数据覆盖度;
(2)二级质谱分“窗口”进行数据采集,减少数据采集的随机性,具有更高的检测
重现性和稳定性,适用于大批量样品的蛋白质组学分析;
(3)依靠多个循环的多个子离子对蛋白质进行定量,定量精密度、准确性、线性范
围大大提高
白定量分析
DIA 还具有以下特点:
(1)实验过程繁琐,对技术要求高,在 DIA 扫描前需要先用 DDA 构建一个真实的谱图库 DDA
library;
(2)二级谱图复杂,对解谱要求高。
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