电转染
将基因编辑系统往细胞中实现有效的递送,是实现细胞基因编辑的重要前提,这一步骤的递送效率与编辑效率呈正相关。电转法,是一种高效的递送方式。通过高压电脉冲在细胞膜上打孔,将外源DNA、RNA或其他分子导入细胞中。这种转染方法可用于大多数细胞类型,具有转染高效、适用范围较广等优势。
服务详情
电转优点 1、递送效率高
2、细胞适用性广
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详情描述
艾迪基因拥有成熟的电转染平台,且结合多年的基因编辑经验,建立了一套高效、完善的电转染实验体系,可提供优质的电转染递送服务,高效地将基因编辑体系递送到目标细胞中。
服务优势
技术路线
应用案例
应用电转方法将HES-KI系统递送至K562细胞中,实现EGFP在Safety Harbor位点插入并成功表达。
1)方法
2)结果
K562细胞电转HES-KI系统未压力筛选细胞Pool
参考文献
传统的基因编辑动物的生成依赖于向受精卵(zygotes)微注射CRISPR/Cas9蛋白和供体DNA,这种方法效率不高,耗时且需要高技术技能。Remy等报告了一种优化的电穿孔(electroporation)方法,用于将sgRNA和Cas9蛋白结合或不结合ssODN(单链DNA片段)传递到完整大鼠受精卵中,以提高基因编辑的效率。该方法使用ssODN作为供体模板,可以在25-100%的分析动物中实现精确的基因敲入(knock-in)突变。
基于ssODN的CRISPR/Cas9介导HDR策略
参考文献
Remy, S., Chenouard, V., Tesson, L. et al. Generation of gene-edited rats by delivery of CRISPR/Cas9 protein and donor DNA into intact zygotes using electroporation. Sci Rep 7, 16554 (2017). https://doi.org/10.1038/s41598-017-16328-y.